小鼠皮肤成纤维细胞与早期胚胎共生体系的构建

摘要

【目的】构建小鼠早期胚胎与皮肤成纤维细胞共生的微环境体系。【方法】分离培养EGFP纯合阳性成年ICR小鼠皮肤成纤维细胞。取激素超排合笼后2.5d小鼠8-细胞胚胎，通过显微操作系统将4～6个EGFP阳性小鼠皮肤成纤维细胞注射到小鼠早期8-细胞胚胎中，转移发育到囊胚阶段的共生胚胎至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上，在小鼠胚胎干细胞分离培养条件下进行培养。【结果】EGFP阳性小鼠成纤维细胞注射到小鼠胚胎后，荧光显微镜下显示，EGFP阳性小鼠成纤维细胞分布到小鼠囊胚组成细胞中，参与小鼠囊胚组成。在发育到囊胚的共生胚胎中，EGFP阳性小鼠成纤维细胞分布到小鼠囊胚细胞中的比例为93．73％（269／287）。在小鼠胚胎干细胞的分离培养条件下，2．60％（7／269）共生胚胎中EGFP阳性小鼠成纤维细胞参与小鼠胚胎内细胞团的组成。【结论】小鼠皮肤成纤维细胞与小鼠早期胚胎能够形成共生的微环境体系。