探究花楸树响应高温胁迫的分子机制,为遗传改良和耐热品种的选育提供基础,依托花楸树叶片转录组测序数据,采用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆得到HSP70家族中的1个基因,命名为S p H S P70-2,同时对该基因进行了生物信息学分析,利用荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对其组织特异性和应答高温胁迫的表达模式进行了分析.结果表明,经克隆得到的SpHSP70-2基因与花楸树叶片转录组测序数据的基因序列一致,S p H S P70-2开放阅读框(O RF)长度为1704 bp,编码567个氨基酸.SpHSP70-2蛋白具有HSP70特征结构域:核苷酸结合结构域(NBD)和底物结合结构域(SBD);S p H S P70-2基因无内含子;SpHSP70-2二级结构中具有ɑ螺旋(32.63％)、延伸链(23.28％)、β转角(7.23％)和随机卷曲链(36.86％);SpHSP70-2蛋白为疏水性蛋白,有11个跨膜螺旋,无信号肽;SpHSP70-2与同科的苹果、白梨的HSP70同源性最高,为90％ 以上;Sp H-S P70-2在花楸树的果实中表达量最大,在茎、根中表达量次之,在花中的表达量最小;在42°C高温胁迫处理下,SpHSP70-2表达量呈现先升高后下降趋势,在2 h时达到极值,随后表达量略缓慢下降,说明Sp HSP70-2基因参与调控花楸树对高温胁迫的响应.研究结果为今后花楸树响应热胁迫的分子机制研究和引种驯化方面提供基础.
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