反向PCR扩增问号赖型钩体重组质粒pDJH_2插入片段

摘要

钩端螺旋体赖型赖株（Ｌ．ｉｎｔｅｒｒｏｇａｎｓＳｅｒｏｖａｒｌａｉ）ＤＮＡ分别经ＢａｍＨＩ，ＨｉｎｄⅢ和ＰｓｔⅠ３种内切酶酶切完全消化，通过设计１对引物，反向ＰＣＲ扩增问号赖型钩体重组质粒ｐＤＪＨ２插入片段两端的未知序列．结果显示不同酶切环化连接，经反向ＰＣＲ扩增均可得２条大小相等的扩增带．结果提示反向ＰＣＲ技术可以用于问号赖型钩体重组质粒插入片段两端的未知序列的研究，为获得钩体完整基因序列提供新的途径．