卵泡抑素相关基因3对肿瘤相关巨噬细胞在乳腺癌增殖、迁移和侵袭中的机制研究

摘要

目的探究卵泡抑素相关基因3(follistatin-related gene 3,FSTL3)对肿瘤相关巨噬细胞(tumour-associated macro-phages,TAMs)在乳腺癌增殖、迁移和侵袭中的作用及其相关机制。方法收集2018年3月至2021年3月在海军军医大学第一附属医院21例乳腺癌患者的肿瘤及其癌旁组织,并提取巨噬细胞。使用佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)、PMA/干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和PMA/白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)诱导THP-1为初始、M1型和M2型巨噬细胞,分别为PMA组、PMA/IFN-γ组、PMA/IL-4组;采用脂质体转染法将si-FSTL3、si-NC转染至THP-1,再使用PMA/IL-4诱导转染后的THP-1,分别为si-FSTL3组、si-NC组。采用流式细胞术鉴定巨噬细胞分型。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quanlita-tive real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blotting检测各组细胞FSTL3的mRNA和蛋白表达情况。收集各组巨噬细胞上清与购买的乳腺癌细胞系MCF7共孵育,通过细胞计数试剂盒(cell counting kit8,CCK8)检测MCF7细胞增殖能力,使用细胞划痕、Transwell实验检测MCF7细胞迁移和侵袭能力。结果与癌旁组织比较,乳腺癌患者TAMs的FSTL3基因表达增加,差异具有统计学意义(P<0.001),表型呈M2型极化。与PMA组相比,PMA/IL-4组高表达FSTL3,其上清共孵育的MCF7细胞增殖、迁移和侵袭能力增加,差异均具有统计学意义(P<0.001)。与si-NC组相比,si-FSTL3组向M2型极化能力减弱,其上清共孵育的MCF7细胞的增殖、迁移和侵袭能力减弱,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论FSTL3通过正向调控TAMs向M2型极化,促进乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。