抗体分子在噬菌体表面蛋白Ⅷ上的展示

摘要

目的　观察抗体分子通过丝状噬菌体主要外壳蛋白Ⅷ和次要外壳蛋白Ⅲ在噬菌体表面呈现效果的差异。方法　分别构建通过次要外壳蛋白Ⅲ或主要外壳蛋白Ⅷ展示抗乙肝表面抗原Fab、ScFv和角蛋白Fab的表达载体 ,制备噬菌体抗体 ,比较其抗原结合活性和Fab呈现水平 ,用多种方法尝试提高主要外壳蛋白Ⅷ介导的噬菌体展示效果。结果　主要外壳蛋白Ⅷ对不同特异性抗体Fab段和不同形式的小分子抗体 (Fab和ScFv)的展示效果均低于次要外壳蛋白Ⅲ的展示 ,增加主要外壳蛋白Ⅷ Fab对野生型和主要外壳蛋白Ⅷ的表达比例、试用不同菌株、在Fab和主要外壳蛋白Ⅷ之间插入间隔序列、换用控制更为严密的启动子等措施 ,均未能改善主要外壳蛋白Ⅷ介导的噬菌体展示。结论　以前所报道的通过主要外壳蛋白Ⅷ多价展示Fab段不是普遍存在的现象 ,对有些抗体基因不能达到多价展示。