铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF和OprH基因扩增、融合、克隆及原核表达

摘要

目的　在大肠杆菌中串联表达铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF和OprH ,获得重组融合蛋白OprF/H ,为抗铜绿假单胞菌的疫苗研究打下基础。方法　从铜绿假单胞菌中提取基因组DNA ,设计PCR引物扩增出OprF和OprH基因 ,扩增片段经过酶切、连接和PCR扩增后 ,割胶回收PCR产物并将其克隆至克隆质粒 ,测序后构建表达质粒pGEX F/H ,并转化大肠杆菌BL2 1。结果　重组表达质粒经IPTG诱导后表达融合外膜蛋白OprF/H。