人骨髓间充质干细胞体外诱导培养成骨的实验研究

摘要

目的　观察人骨髓间充质干细胞的生长特点及诱导条件下的成骨能力。方法　抽取人骨髓组织 ,梯度离心后 ,保留贴壁细胞传代 ,稳定传代后改用含地塞米松、β 甘油磷酸钠和维生素C的诱导培养液 ,通过倒置显微镜观察、碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组化染色等方法进行观测。结果　原代人骨髓间充质干细胞 10～ 12d左右即可长满 ,并可稳定传代 ,传代细胞 5～ 6d即可传代 ,在诱导培养液中 2周形成多层结构 ,并聚集成细胞钙化结节。诱导培养细胞碱性磷酸酶染色 ,骨钙素免疫组化染色阳性。结论　人骨髓间充质干细胞经合理的体外诱导培养后 ,符合成骨细胞的形态特征和生物学特性 ,可为体外构建组织工程化骨提供自体种子细胞。