稽留流产绒毛组织中APPL1,Nrf2和HO-1的水平表达与氧化应激的相关性研究

摘要

目的 探讨稽留流产绒毛组织中蛋白亮氨酸拉链基序1(leucine zipper motif 1,APPL1)、核因子E2相关因子2(Nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素加氧酶1(haem oxygenase 1,HO-1)的水平表达与氧化应激的相关性。方法 取46例稽留流产并行人流术治疗者为实验组,取50例同期正常早孕并行人工流产术者为对照组,收集两组绒毛组织标本,用放射免疫沉淀法裂解缓冲液(radio immunopreci pitation assay lysis buffer,RIPA)提取绒毛组织蛋白。用免疫组织化学法检测绒毛组织中APPL1,Nrf2和HO-1蛋白表达;用Western blot检测绒毛组织中APPL1,Nrf2和HO-1蛋白水平;酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定绒毛组织中氧化应激指标[超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)]水平。Pearson检验分析实验组绒毛组织中APPL1,Nrf2和HO-1蛋白水平与氧化应激指标水平的相关性。结果实验组绒毛组织中APPL1,Nrf2和HO-1表达阳性率分别为21.7%,32.6%和26.1%,明显低于对照组的56.0%,64.0%,58.0%,差异均有统计学意义(χ^(2)=9.442~11.759,均P<0.05);APPL1(3.2±0.9),Nrf2(3.7±0.7)和HO-1(3.5±0.8)表达免疫组化评分亦明显低于对照组(4.6±1.4,5.5±1.7,5.1±1.3),差异有统计学意义(t=5.772~7.187,均P<0.05)。实验组绒毛组织中APPL1(1.3±0.1),Nrf2(0.7±0.1)和HO-1(1.1±0.1)蛋白表达水平明显低于对照组(1.6±0.2,1.1±0.0.1,1.4±0.1),差异有统计学意义(t=9.171~19.579,均P<0.05)。实验组绒毛组织中ROS(8.4±1.5U/ml),MDA(11.7±2.3nmol/ml)水平明显高于对照组(3.6±0.5U/ml,5.6±0.8nmol/ml),SOD(23.9±6.8U/ml)水平明显低于对照组(28.1±6.6U/ml),差异均有统计学意义(t=3.070~21.381,均P<0.05)。实验组绒毛组织中APPL1,Nrf2和HO-1蛋白表达与ROS水平呈负相关(r=-0.628,-0.510,-0.575,均P<0.05);与MDA水平呈负相关(r=-0.541,-0.489,-0.556,均P<0.05);与SOD水平呈正相关(r=0.359,0.423,0.408,均P<0.05)。结论APPL1,Nrf2和HO-1在稽留流产绒毛组织中呈低表达,且与氧化应激指标ROS,MDA和SOD水平具有显著相关性,其三者异常表达可能通过介导氧化应激失衡进而诱导了稽留流产的发生。