维奈克拉增强MDS细胞系对地西他滨化疗敏感性机制的实验研究

摘要

目的研究维奈克拉(venetoclax,VCX)对骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)细胞系地西他滨(decitabine,DAC)化疗敏感性的可能作用机制。方法CCK-8法检测不同浓度VCX对MDS细胞(SKM-1和MUTZ-1细胞系)增殖活力的影响;将MUTZ-1细胞根据不同处理分为4组:对照组、VCX组、DAC组和VCX+DAC组;Annexin V-FITC/PI法检测各组细胞凋亡率;Western blotting检测细胞中凋亡相关蛋白[细胞色素C(cytochrome C),裂解型半胱天冬酶3(cleaved Caspase-3)表达水平],B细胞白血病/淋巴瘤2(B cell leukemia/lymphoma-2,Bcl-2)与Bcl-2相关蛋白X(Bax)比值;JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测各组SKM-1和MUTZ-1细胞的线粒体膜电位;H2DCF-DA荧光探针法检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;Western blotting检测细胞中自噬相关蛋白Beclin1,P62和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。结果随VCX浓度升高,MUTZ-1细胞增殖活性明显降低,且呈浓度依赖性(F=0.003,P=0.001)。与对照组(4.28%±1.66%)相比,VCX组(13.75%±3.02%),DAC组(12.39%±4.16%)和VCX+DAC组(18.10%±3.50%)细胞凋亡率明显增高,差异有统计学意义(F=45.782,P0.05)。结论VCX可能通过调节细胞凋亡、自噬和氧化应激来促进MDS细胞对DAC的化疗敏感性。