lncRNA ACTA2-AS1通过靶向下调miR-586表达抑制子宫内膜癌生物学行为的研究

摘要

目的 分析长链非编码RNA(lncRNA)ACTA2-AS1在子宫内膜癌中的表达,探讨ACTA2-AS1对子宫内膜癌细胞周期和迁移的作用及其分子机制.方法 采用GEPIA数据库分析ACTA2-AS1在子宫内膜癌组织中的表达水平.qRT-PCR检测ACTA2-AS1在子宫内膜癌细胞系和正常子宫内膜上皮细胞ESC中的表达水平.分别转染空白质粒(NC组)和AC-TA2-AS1过表达质粒(ACTA2-AS1组)至AN3CA细胞.流式细胞法和细胞划痕实验分别检测ACTA2-AS1对子宫内膜癌细胞AN3CA的G0～G1期细胞比例和迁移能力的影响.LncBase v.2数据库预测ACTA2-AS1的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证ACTA2-AS1对靶基因的调控作用.qRT-PCR或Western blot法检测磷酸酶及张力蛋白同源物基因(PTEN)和PI3 K-AKT-mTOR信号通路蛋白表达.结果 GEPIA数据库显示ACTA2-AS1在子宫内膜癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01).ACTA2-AS1在子宫内膜癌细胞系中的表达水平显著低于ESC细胞(P<0.05),ACTA2-AS1表达最低的细胞系是AN3CA(P<0.01).与NC组比较,上调ACTA2-AS1表达可以增加G0～G1期细胞比例(P<0.01).NC组和ACTA2-AS1组AN3CA细胞迁移率分别为69.54％ ±6.64％和40.46％ ±3.76％,上调ACTA2-AS1可以抑制AN3CA细胞迁移能力(P<0.01).ACTA2-AS1能够靶向结合miR-586(P<0.01).与NC组比较,上调ACTA2-AS1可明显抑制miR-586表达(P<0.01),PTEN基因表达明显增加(P<0.01),PI3K-AKT-mTOR信号通路蛋白表达降低.结论 ACTA2-AS1在子宫内膜癌组织和细胞系中表达降低.对于存在PI3 K-AKT-mTOR信号通路的子宫内膜癌类型,上调ACTA2-AS1表达通过靶向调控miR-586,促进PTEN基因表达和抑制PI3 K-AKT-mTOR信号通路活化,抑制子宫内膜癌细胞周期和迁移.