miR-21负向调控宫颈癌HeLa细胞株中hTERT的表达

摘要

目的通过观察在miR-21作用下hTERT的表达情况,探讨在宫颈癌HeLa细胞中miR-21对hTERT的调控作用。方法利用RT-PCR法及West Blot法分别检测HeLa中miR-21的表达,以及hTERT蛋白的表达情况;通过实验设计,生成miR-21模拟物和miR-21抑制剂,并分别设立两组的空白对照序列;将空转liposome2000(lipo2000)设为对照组,利用脂质体liposome2000包裹宫颈癌细胞株HeLa并予以转染。在转染后24 h及时检测hTERT及蛋白的表达量。结果HeLa细胞株中miR-21及hTERT表达阳性;转染后24 h模拟物组、模拟物对照组、抑制剂组、抑制剂对照组、脂质体组hTERT mRNA相对表达水平分别为(0.51±0.33)、(0.69±0.19)、(1.33±0.39)、(0.83±0.26)和(0.58±0.16);蛋白相对表达水平分别为(0.41±0.18)、(0.62±0.18)、(1.45±0.60)、(0.83±0.15)和(0.82±0.30);模拟物组与其对照组及脂质体组相比较,hTERT mRNA及蛋白表达情况均较低且差异有统计学意义(P<0.05);相反,在抑制剂组与其对照组及脂质体组相比较中,hTERT mRNA及蛋白表达情况明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过检测发现miR-21及hTERT基因在HeLa细胞株中均呈现高表达状态;miR-21可以调节hTERT mRNA和蛋白表达水平,从而发挥负向调控hTERT的作用。