人转化生长因子β1在大肠杆菌RR1中的表达及产物纯化

摘要

目的:构建能高效表达人转化生长因子β1的基因工程菌,优化产物分离纯化的条件方法:用PCR方法扩增人转化生长因子β1的cDNA,将该cDNA片段插入经改造的pBV 220表达载体pBL 2的表达框架中,构建了表达菌株RR1/pBL2-TGF-β1.42℃温控诱导表达.采用谷胱甘肽法,对重组蛋白进行复性.通过阳离子交换、变性分子筛层析纯化重组蛋白.用MTT法测定重组蛋白的活性.结果:所构建的表达菌株,其TGF-β1的表达量约为15%.重组蛋白的复性率达到30%.经纯化获得了银染一条带的重组蛋白.测活表明重组蛋白具有较强的生物活性.结论:人转化生长因子β1在大肠杆菌RR1中实现了高效表达,获得了具有生物活性的重组TGF-β1.