猪白血病抑制因子的真核表达与活性分析

摘要

采用分子克隆技术构建猪白血病抑制因子(UF)的真核表达载体,表达重组猪LIF蛋白并分析其活性.酶切和DNA测序显示,所构建的真核表达质粒pcDNA3.1-pLIF-MycHis含有编码分泌型猪LIF蛋白的cD-NA序列;免疫印迹分析显示,分泌到上清中的重组蛋白在相对分子质量约37 000的位置上有明显的增强表达条带;活性分析结果显示,重组蛋白能够维持小鼠E-14胚胎干细胞在未分化状态.该结果显示重组猪LIF蛋白在CHO细胞中进行了正确表达并具有很好的生物活性,能够用来培养小鼠胚胎干细胞,为用于猪胚胎干细胞系的研究奠定了良好的基础.