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猪囊尾蚴Eno4-JL蛋白间接ELISA方法的建立

     

摘要

为了建立猪囊尾蚴病的病原学检测方法,试验通过猪带绦虫烯醇化酶基因Eon4与猪囊尾蚴特异性抗原基因串联并进行原核表达,获得纯化的Eno4-JL蛋白并建立猪囊尾蚴的间接ELISA检测方法。结果显示:最佳抗原包被质量浓度为3 mg/L;血清最佳稀释浓度为1∶100,作用时间为60 min;酶标二抗最佳浓度为1∶20 000,作用时间90 min;底物显色时间为30 min;与猪囊尾蚴阴性、华枝睾虫、棘球蚴、肝片吸虫均无交叉反应;重复性试验组内变异系数与组间变异系数在1%~4%,证明其重复性良好。结果表明:试验建立的ELISA方法具有较好的敏感性、特异性及重复性,可初步用于猪囊尾蚴病的检测。

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