基于单克隆抗体的滴滴涕、硫丹和水胺硫磷酶联免疫检测方法研究

摘要

该研究制备了滴滴涕、硫丹和水胺硫磷的单克隆抗体.利用商业化的辣根过氧化物酶标记羊抗鼠抗体作为检测二抗,分别建立了 3种农药的间接竞争酶联免疫吸附分析方法(Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA).在最优条件下,ic-ELISA对滴滴涕、硫丹和水胺硫磷检测的半数抑制浓度和检出限分别为 10.72 ng·mL-1 和 1.85 ng·mL-1、9.69 ng·mL-1 和2.19 ng·mL-1 及 13.26 ng·mL-1 和3.04ng·mL-1.特异性评价结果显示,滴滴涕对o,p'-滴滴伊、p,p'-滴滴伊和o,p'-滴滴涕的交叉反应率(CR)为9.0％～33.4％;硫丹对艾氏剂、氯丹、狄氏剂、β-硫丹和α-硫丹的交叉反应率为17.4％～84.3％;水胺硫磷对其6种结构类似物均无明显交叉反应(CR＜0.1％).所建立的方法对稻田水、土壤、苹果和香蕉样品中滴滴涕、硫丹和水胺硫磷的平均加标回收率和相对标准偏差分别为71.4％～93.3％和3.8％～9.6％、74.0％～97.4％和3.0％～11％及70.8％～97.0％和4.2％～12％.同时,ic-ELISA对滴滴涕、硫丹和水胺硫磷的检测结果与色谱仪器具有较好的一致性.上述结果表明,该研究制备的滴滴涕、硫丹和水胺硫磷的单克隆抗体可用于建立ic-ELISA,且具有较好的灵敏度和准确性.