传染性造血器官坏死病毒RT-RAA快速检测方法的建立

摘要

为了给传染性造血器官坏死病(Infectious Hematopoietic Necrosisvirus,IHN)的防控提供特异、灵敏、快速的检测方法,根据NCBI基因库中传染性造血器官坏死病病毒(Infectious Hematopoietic Necrosis Virus,IHNV)保守序列设计特异性引物和探针,建立IHNV的逆转录重组酶介导扩增(Reverse Transcription Recombinase-aid Amplification,RT-RAA)检测技术。结果表明,该方法具有很高的特异性。其最低可检出100 copies/μL,检测灵敏度与OIE建议的RT-PCR方法相当。对35份虹鳟(含金鳟)养殖场样品检测并与RT-PCR方法进行比较,该方法的检测结果符合率达到96%以上。本文建立的RT-RAA方法具有操作简便、灵敏度高、特异性好、检测周期短、不需要昂贵仪器,结合荧光探针能够实现实时检测以及现场快速检测等优点。该方法的建立及应用可为IHN防控提供新的有用的检测工具。