菠萝液泡膜水通道蛋白基因AcTIP1-1的克隆、重组载体构建

摘要

以菠萝(Ananas comosus(Linn.)Merr.)果实为材料,通过RT-PCR分别扩增液泡膜水通道蛋白基因(AcTIP1-1)(GenBank登录号:XM_020238793.1)的开放阅读框(ORF)和编码区(CDS)序列,序列长度分别为753 bp和750 bp.将ORF序列亚克隆到载体pET32a(+)上,CDS序列被亚克隆到载体pSP64 Poly(A)上,构建成重组载体pET32a(+)-AcTIP1-1和pSP64 Poly(A)-AcTIP1-1.pET32a(+)-AcTIP1-1可为诱导表达并纯化融合蛋白制备抗体,pSP64 Poly(A)-AcTIP1-1可为制备含有Poly(A)+的AcTIP1-1转录子奠定基础.