神经生长因子高亲和力受体互补核糖核酸探针的研究

摘要

目的　制备用地高辛标记的神经生长因子高亲和力受体 (TrkA)正、反义互补核糖核酸 (cRNA)探针的研究。方法　设计TrkA引物 ,构建pGEM TEasy TrkA重组质粒 ,分别用ApaⅠ和SacⅠ进行酶切得到线性DNA片段 ,以SP6和T7RNA聚合酶转录合成带有地高辛标记的高比活度的正、反义单链cRNA探针。结果　经斑点杂交证实 ,该探针敏感性高、特异性强。TrkA ApaⅠ探针稀释 12 5 0 0倍后的浓度为 40ng μl;TrkA SacⅠ稀释 1∶2 5 0 0倍后的浓度为 8ng μl;。 结论　成功制备了地高辛标记的TrkAcRNA探针 ,为毒理学中有关TrkAmRNA在组织。