网络药理学、分子对接技术结合体外实验探讨益气解毒方及其活性成分槲皮素抑制鼻咽癌增殖的机制

摘要

目的基于网络药理学、分子对接技术结合体外实验,探讨益气解毒方及其活性成分槲皮素抑制鼻咽癌增殖的可能机制。方法运用TCMSP、BATMAN-TCM、GEO、GeneCards、OMIM、TTD、PharmGkb等数据库检索益气解毒方的化学活性成分及鼻咽癌的作用靶点;STRING数据库构建可视化PPI网络;关键作用靶点进行GO和KEGG富集分析;采用分子对接验证槲皮素的可能靶点TP53、MYC、MDM2和AKT1;采用CCK-8法和RTCA法检测益气解毒方及主要活性成分槲皮素抑制鼻咽癌细胞CNE-2增殖的效应;采用Western blot检测药物对细胞增殖及PI3K/Akt信号通路关键蛋白表达的影响。结果筛选得到益气解毒方有效化学成分197种,得到潜在共同作用靶点173个,核心基因为TP53、JUN、MAPK3、MYC等;KEGG分析主要富集在PI3K/Akt、MAPK等信号通路;分子对接结果示槲皮素与TP53、AKT1、MDM2、MYC均具有良好的结合位点;体外实验证实益气解毒方及槲皮素能抑制细胞增殖;药物能下调增殖相关蛋白XIAP、PCNA、Survivin及PI3K/Akt信号通路蛋白PI3K、AKT1、p-AKT1、mTOR的表达水平;激活PI3K/Akt信号通路后,槲皮素抑制细胞增殖的效应被削弱。结论益气解毒方及主要活性成分槲皮素可能通过下调PI3K/Akt信号通路抑制鼻咽癌细胞增殖。