4种免疫磁珠分离模拟混合斑效果比较

摘要

目的建立免疫磁珠捕获精子的方法,比较4种不同抗体制备的免疫磁珠捕获模拟检材中精子的效果,探索其分离混合斑的可行性以及优缺点。方法分别用4种抗体制备免疫磁珠,对不同比例混合细胞悬液（上皮细胞与精子）中的精子和放置不同时间的纯精斑进行提取,将磁珠吸附到的细胞进行DNA-STR分型,对比4种磁珠的差异。结果4种磁珠都能特异性地将精子分离出来,分型结果与男性供者已知分型一致。经X2检验,当上皮细胞与精子的比例大于100：1或小于10：1时,P〉0.05,捕获结果没有明显差异;当其比例在10：1时,P〈0.05,抗PH20抗体磁珠的灵敏度高于其余三种抗体。捕获放置1天和15天精斑的成功率结果差别P〉0.05,没有明显差异。捕获放置30天的精斑结果差别P〈0.05,抗JLP抗体磁珠有明显优势,而抗ADAM2抗体磁珠效果最差。结论4种不同抗体制备的免疫磁珠在捕获精子的灵敏度上有差异,可以根据需要选择抗体制备免疫磁珠,有望实现对不同混合斑的分离。