家福捕鸟蛛毒素-22钠通道活性与基本性质分析

摘要

家福捕鸟蛛(Selenocosmia jiafu,S.jiafu)是一种生活在中国广西、云南等地的蜘蛛新种.研究发现其粗毒对大鼠背根神经节(Rat dorsal root ganglion,DRG)细胞河豚毒素不敏感型钠通道(tetrodotoxin-resistant,TTX-R)具有抑制作用.为了筛选得到抑制TTX-R活性的毒素分子,经反相高效液相色谱,从家福捕鸟蛛粗毒中分离得到1种新的毒素分子,命名为家福捕鸟蛛毒素-22(Jiafu toxin-22,JFTX-22).MALDI-TOF质谱分析和氨基酸序列分析表明该多肽毒素分子量为2807.227 Da,全序列为RCLPSGKACAGVTQK IPCCGSCVRGKCS.全细胞膜片钳分析表明JFTX-22对DRG细胞TTX-R通道具有抑制作用.此外,采用生物信息学方法初步分析了JFTX-22的基本理化性质、空间结构预测和同源序列比对等.结果表明JFTX-22的全长cDNA为471bp,编码一个65个氨基酸残基多肽.JFTX-22的二级结构主要以无规卷曲为主,其空间结构主要包含无规卷曲和三段反平行beta-折叠.同源序列比对发现JFTX-22跟Covalitoxin-I序列完全一致,与另外三种蜘蛛毒素JZTX-51、U1-theraphotoxin-Pf3和HWTX-X同源性较高.结果表明JFTX-22是一种潜在的具有镇痛活性的新型毒素分子.