Sepharose FF凝胶柱分离参数变化对蝎毒抗癌多肽纯化的影响

摘要

目的 :优选蝎毒抗癌多肽 (antineoplasticpolypeptidefromButhusmartensiivenom ,APBMV)组分Ⅲ (antineoplas ticpolypeptide ⅢfromAPBMV ,AP Ⅲ )的分离参数。方法 :采用不同长度的SepharoseFF阳离子交换凝胶柱及不同的样品洗脱速度 ,比较AP Ⅲ的分离效果。结果 :当柱长为 2 5cm ,直径为 5cm ,流速为 1 .0ml/min时 ,可分离出 6个峰 ,AP Ⅲ纯度为 89% ;分别以 0 .8,0 .5和 0 .2ml/min流速进行层析 ,可分别分离出 6 ,4,3个峰 ,AP Ⅲ相应的纯度为89% ,85 %、83%。当柱长为 1 2 .5cm ,而其他条件相同时 ,均得到 2个峰 ,相应的AP Ⅲ纯度分别为 83% ,82 % ,80 %和 78%。结论 :分离、纯化AP Ⅲ较理想参数为柱长 2 5cm ,直径 5cm ,流速 0 .8ml/min ,梯度洗脱时间 1 2 0 0min。