清郁和降汤抑制反流性食管炎大鼠5-HT释放及TGR5/TRPA1通路蛋白表达

摘要

【目的】探讨清郁和降汤对反流性食管炎（RE）大鼠的治疗作用及机制。【方法】将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组，模型组，中药低、中、高剂量组及西药组，每组8只。除假手术组，其余5组大鼠采用前胃结扎联合外置幽门部分结扎术建立反流性食管炎模型。成功造模后，中药低、中、高剂量组分别对应给予清郁和降汤7.9、15.8、31.6 g·kg-1·d-1灌胃，西药组给予泮托拉唑蒸馏水混悬液8.4 mg·kg-1·d-1、莫沙比利蒸馏水混悬液0.19 mg·kg-1·d-1灌胃，假手术组与模型组给予等体积蒸馏水灌胃。连续灌胃14 d后，将所有大鼠处死取材。采用苏木素-伊红（HE）染色法观察食管组织病理学改变，采用酶联免疫吸附分析（ELISA）检测血清中5-羟色胺（5-HT）、色氨酸羟化酶1（TPH1）、P物质（SP）、降钙素基因相关肽（CGRP）的含量，分别采用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法、蛋白免疫印迹（Western Blot）法对应检测食管组织G蛋白偶联胆汁酸受体5（TGR5）、瞬时受体电位锚蛋白1（TRPA1）、瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）、磷脂酶C（PLC）、蛋白酶激活受体2（PAR2）mRNA或蛋白表达水平。【结果】与假手术组比较，模型组大鼠可见食管黏膜出现较为明显的损伤及炎细胞浸润，血清中5-HT、TPH1、SP、CGRP含量显著增高（P＜0.01），食管组织中TRG5、TRPA1、TRPV1、PLC、PAR2 mRNA及蛋白表达水平显著增高（P＜0.01）；与模型组比较，中药低、中、高剂量组及西药组大鼠食管黏膜病理损伤得到明显改善，血清中5-HT、TPH1、SP、CGRP含量显著降低（P＜0.01），食管组织中TRG5、TRPA1、TRPV1、PLC、PAR2 mRNA及蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。【结论】清郁和降汤可有效改善大鼠反流性食管炎，其机制可能与抑制TGR5/TRPA1通路，减少5-HT释放，进而降低食管敏感性有关。