酶解法分离与同源血清培养SD大鼠胃Cajal间质细胞的实验研究

摘要

[目的]探讨体外酶解法分离、同源血清培养SD大鼠胃Cajal间质细胞(ICC)的实验方法.[方法]无菌条件下分离大鼠胃窦组织,酶解法分离制备ICC细胞悬液,接种于M199完全培养基(含10％大鼠同源血清,不合胎牛血清及重组鼠类干细胞因子)进行培养,倒置显微镜下观察细胞形态变化,适时换液,MTT法测定ICC对数生长曲线,C-kit特异性抗体免疫荧光染色法鉴定ICC,并取对数生长期细胞进行传代培养.[结果]同源血清培养ICC成活并体现其特有的生长曲线及形态学特征,C-kit特异性抗体免疫荧光染色证实细胞为ICC,且细胞传代培养成功.[结论]酶解法可以对SD大鼠胃窦ICC进行分离,在不使用胎牛血清(FBS)及重组鼠类干细胞因子(SCF)培养的条件下,含大鼠同源血清的M199完全培养基可以完成ICC原代培养及传代培养.该项培养方法可行,为研究ICC生物学特性及其与胃肠病学的临床和基础关系奠定基础.