白藜芦醇抑制HIF-1α对肾癌细胞线粒体功能及抗乏氧增殖的调控

摘要

目的:观察白藜芦醇(Res)抑制缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对肾癌细胞内钙离子、线粒体功能的影响,探讨其在肾癌细胞抗乏氧增殖过程中的可能机制.方法:将人肾癌GRC-1细胞分为正常组和缺氧组,正常组细胞在常氧条件下培养,缺氧组用150μmol/L二氯化钴干预GRC-1细胞48 h构建缺氧肾癌细胞模型.两组各给予不同浓度(0μmol/L、20μmol/L、40μmol/L和60μmol/L)的Res进行干预.采用MTT法检测细胞活力,分别采用RT-qPCR、酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测细胞内HIF-1α基因和蛋白表达,分光光度计检测细胞内钙离子水平及线粒体膜电位(ΔΨm)、线粒体通透性转换孔(mPTP)开放程度.结果:随着Res浓度的增加,两组细胞活力、HIF-1α基因及蛋白表达量均逐渐降低,缺氧组显著高于正常组,缺氧组细胞活力下降趋势明显缓于正常组(均P<0.05).两组细胞内钙离子含量和mPTP开放程度均随Res浓度的增加而逐渐升高,Δ?m逐渐降低,且缺氧组细胞内钙离子含量和mPTP开放程度显著高于正常组,Δ?m明显低于正常组(均P<0.05).结论:Res可能通过增加细胞内钙离子含量,促进mPTP开放,降低ΔΨm,使线粒体解偶联功能受损,从而抑制细胞增殖,但该抑制作用随着Res对HIF-1α的进行性抑制而逐渐减弱,该作用可能参与了肾癌细胞的抗乏氧增殖机制.