胃癌患者血清红桂木凝集素结合蛋白的分析

摘要

目的:寻找胃癌患者血清中的差异蛋白,以期为胃癌诊断提供依据.方法:应用生物素—链霉亲和素磁珠结合红桂木凝集素(ALL)后分别与正常人和胃癌患者血清共孵育,经pull-down实验、蛋白质银染、液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)鉴定,并结合数据库分析差异蛋白的表达情况.结果:银染分析显示,胃癌组与正常组之间存在明显差异蛋白条带.从正常血清和胃癌血清中分别鉴定到1个和41个ALL结合蛋白.将ALL结合蛋白与基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库中差异表达最显著的1 000个胃癌相关蛋白进行交集,得到8个共有蛋白,其中免疫球蛋白重链恒定区γ2(IGHG2)、载脂蛋白E(APOE)、免疫球蛋白κ恒定区(IGKC)、免疫球蛋白κ可变区2D-28(IGKV2D-28)和Serpin家庭成员1(SERPINA1)在胃癌组织显著高表达(P＜0.05),除SERPINA1外,其它4个蛋白的表达水平在胃癌不同病理分期中存在显著性差异(P＜0.05).间-α-胰蛋白酶抑制剂重链H4(ITIH4)、维生素D结合蛋白(GC)和血清类黏蛋白1(ORM1)蛋白在胃癌组织中显著低表达(P＜0.05),其中ITIH4的表达水平与患者生存率相关(P＜0.05).结论:ALL结合蛋白IGHG2、APOE、IGKC、IGKV2D-28、SERPINA1、ITIH4、GC和ORM1有望成为胃癌诊断的血清标志物.