乳果糖调控NOX4/NLRP3通路对类风湿性关节炎大鼠的保护作用

摘要

目的:探讨乳果糖调控烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/核苷酸结合域样受体蛋白3(NLRP3)通路对类风湿性关节炎(RA)大鼠的保护作用。方法:将50只大鼠随机分为对照组、RA组、乳果糖(0.25 g/kg)组、乳果糖+NOX4抑制剂GKT137831(10 mg/kg)组、甲氨蝶呤(0.35 mg/kg)组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠通过尾根处皮内注射胶原乳液建立RA大鼠模型。造模完成后各组灌胃给予相应药物处理。灌胃结束次日进行关节炎评分,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测到大鼠粪便肠道菌群所占比例,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。苏木精—伊红(HE)染色观察踝关节组织病理学变化。蛋白印迹(western blotting)法检测NOX4、NLRP3蛋白表达。结果:与对照组相比,RA组大鼠出现炎性浸润、少量纤维蛋白沉积以及滑膜出血等病理现象,粪便中拟杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌所占比例显著降低,而放线菌所占比例、平均关节炎评分,血清TNF-α、IL-6水平及关节组织中NOX4、NLRP3蛋白表达水平显著升高(均P0.05)。与乳果糖组相比,乳果糖+GKT137831组病理损伤得到进一步改善,大鼠粪便中拟杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌所占比例显著增高,放线菌所占比例、平均关节炎评分,血清中TNF-α、IL-6水平,关节组织中NOX4、NLRP3蛋白表达水平显著降低(均P<0.05)。结论:乳果糖可减轻RA大鼠炎性反应,其机制可能与抑制NOX4/NLRP3通路有关。