Liproxstatin-1对K562白血病细胞的增殖抑制作用及其机制研究

摘要

目的:研究Liproxstatin-1(Lip-1)对K562白血病细胞株的抑制作用。方法:采用CCK-8法检测不同浓度Lip-1处理前后的细胞活力。将未经任何处理的K562细胞作为对照组,10μmol/L Lip-1处理24 h的K562细胞作为低浓度组,20μmol/L Lip-1处理24 h的K562细胞作为高浓度组。用二代测序法分析各组转录组表达差异。分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blotting法检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂-1A(CDKN1A)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)基因及蛋白表达,流式细胞术检测细胞周期时相,微量法测定细胞内谷氨酸含量。将K562细胞在含或不含谷氨酰胺培养基中培养,用细胞计数法检测细胞倍增时间(DT)变化。结果:Lip-1浓度依赖性抑制K562白血病细胞增殖。与对照组相比,低、高浓度组CDKN1A、SLC7A11基因及蛋白表达水平增高(P<0.05),高浓度组细胞内谷氨酸含量下降(P<0.05),低浓度组发生G1/S阻滞,而高浓度组同时存在G1/S和G2/M阻滞。K562细胞在不含谷氨酰胺培养基培养时细胞的DT较含谷氨酰胺组增高(P<0.05)。结论:Lip-1可抑制K562白血病细胞增殖,其机制可能与SLC7A11表达增高引起的谷氨酸剥夺及CDKN1A表达增高引起的细胞周期阻滞有关。