人胎盘滋养层细胞的分离培养及HCV体外感染试验

摘要

目的　体外分离培养较高纯度的胎盘滋养层细胞 ,观察其生物学特性 ,探讨丙型肝炎病毒 (HCV)经胎盘母婴传播的具体途径 .方法　采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎盘组织 ,以 35 % ,4 5 %两个 Percoll密度梯度进行分离纯化 .并用免疫组化及透射电镜等技术对其生物学特性进行观察 .HCV阳性血清感染体外分离培养的胎盘滋养层细胞 ,通过逆转录聚合酶链反应及扩增敏感试验对培养上清进行定性、定量检测 ,以观察 HCV的感染及复制情况 .结果　胎盘组织中滋养层细胞角蛋白染色阳性 ,血管内皮细胞及基质成分波形蛋白染色阳性 ,经该法分离纯化的细胞角蛋白染色阳性者 (滋养层细胞 )占 90 %以上 ,电镜下滋养层细胞可观察到成熟型、中间型、未成熟型三种形态 .HCV感染细胞培养 16 d内培养上清中可间断检测出 HCV RNA.结论　改进后的分离方法可以得到较高纯度的滋养层细胞 ,HCV感染胎盘滋养层细胞可能是 HCV宫内母婴传播的途径之一 .