lncRNA LINC01082靶向调控miR-543抑制膀胱癌恶性进展的实验研究

摘要

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01082对膀胱癌细胞生物学行为的影响机制.方法 采用RT-qPCR检测40例膀胱癌组织及对应癌旁组织、膀胱癌细胞系(BIU87、5637、J82、UM-UC-3)中LINC01082和miR-543的表达水平,并分析其相关性.双荧光素酶报告基因实验检测LINC01082和miR-543的靶向关系,将J82细胞分别转染LINC01082过表达质粒(LINC01082组)及对应空载体(空载体组)、miR-543模拟物(miR-543组)及对应阴性质粒(miR-NC组)和共转染LINC01082过表达质粒和miR-543模拟物(LINC01082+miR-543组),设未转染组为空白组.采用MTT法、Transwell实验和流式细胞术分别检测各组细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡率变化,Western blot检测细胞中Ki-67、MMP-9、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平.结果 与癌旁组织比较,膀胱癌组织中LINC01082表达水平降低,而miR-543表达水平升高(P<0.05),且二者表达水平呈负相关;与正常膀胱上皮细胞比较,BIU87、5637、J82、UM-UC-3细胞中LINC01082表达水平降低,miR-543表达水平升高(P<0.05).转染miR-543模拟物可使野生型LINC01082质粒的荧光素酶活性降低(P<0.05);与空白组比较,LINC01082组细胞增殖能力、迁移、侵袭能力和细胞中Ki-67、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平明显降低,细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与LINC01082组比较,LINC01082+miR-543组细胞增殖能力、迁移、侵袭能力和细胞中Ki-67、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平明显升高,细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论 LINC01082在膀胱癌中低表达,可能通过靶向miR-543发挥抑癌作用.