微小RNA-4652-3p通过下调GRHL2表达抑制肾癌细胞的增殖和迁移

摘要

目的 观察微小RNA(miRNA)-4652-3p在肾癌组织中的表达及其对肾癌细胞增殖和迁移的影响.方法 通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肾癌组织和癌旁组织、肾癌细胞系和正常肾小管上皮细胞系中miR-4652-3p的表达.选择miR-4652-3p表达量最低的肾癌细胞系分别转染miR-4652-3p模拟物(实验组)和无义序列(对照组).采用MTT法检测细胞的增殖,采用细胞划痕实验评估细胞迁移的能力.miRWalk 2.0数据库预测miR-4652-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miR-4652-3p的靶基因.qRT-PCR检测靶基因的表达.Western blot检测靶基因蛋白和PI3K/Akt信号通路蛋白的表达.结果 miR-4652-3p在肾癌组织中的表达低于癌旁组织(P<0.01),在肾癌细胞系中的表达低于正常肾小管上皮细胞,在786-O细胞系中的表达最低(P<0.01).上调786-O细胞miR-4652-3p的表达可明显抑制细胞的增殖(P<0.05)和迁移能力(P<0.05).miRWalk 2.0数据库显示miR-4652-3p的靶基因可能是粒状头样2(GRHL2),双荧光素酶报告基因实验证实miR-4652-3p与GRHL2配对结合(P<0.01).相比对照组,实验组786-O细胞中GRHL2基因表达显著降低(P<0.01),PI3K/Akt信号通路活化被抑制.结论 miR-4652-3p在肾癌组织中低表达,miR-4652-3p通过靶向干扰GRHL2基因表达,抑制PI3K/Akt信号通路的活化,从而抑制肾癌786-O细胞增殖和迁移能力.