Sema4D在乙型肝炎肝硬化患者外周血T淋巴细胞和血清中的表达及意义

摘要

目的研究乙型肝炎肝硬化患者外周血T淋巴细胞和血清中Sema4D的表达,分析其与临床指标的相关性。方法纳入2020年10月—2021年11月在联勤保障部队第九四〇医院就诊的20例慢性乙型肝炎(CHB)患者,68例乙型肝炎肝硬化患者以及20例健康对照者。根据Child-Pugh分级标准将乙型肝炎肝硬化患者分为Child-Pugh A级组(n=24)、B级组(n=24)和C级组(n=20)。采集患者外周血,分离血清及外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测PBMC中膜结合型Sema4D(mSema4D)^(+)CD4^(+)T、mSema4D^(+)CD8^(+)T淋巴细胞的表达,酶联免疫吸附实验检测血清中可溶型Sema4D(sSema4D)的表达,分析其与病毒复制、肝脏炎症指标的相关性。符合正态分布的计量资料多组间比较用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验;非正态分布的计量资料多组间比较用Kruskal-Wallis H检验,进一步两两比较采用Mann-Whitney U检验;采用Spearman进行相关性分析。结果mSema4D^(+)CD4^(+)T、mSema4D^(+)CD8^(+)T淋巴细胞的表达在CHB组、乙型肝炎肝硬化组和对照组3组间比较差异均有统计学意义(F值分别为43.092、13.344,P值均<0.001),进一步两两比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。随着Child-Pugh分级的增加,mSema4D^(+)CD4^(+)T淋巴细胞、mSema4D^(+)CD8^(+)T淋巴细胞的表达水平逐渐降低(F值分别为14.093、17.154,P值均<0.05),进一步两两比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。对照组、CHB组、乙型肝炎肝硬化组sSema4D含量分别为1.54(1.42~1.71)ng/mL、1.08(1.07~1.38)ng/mL、4.87(2.13~14.97)ng/mL,3组间比较差异有统计学意义(H=32.366,P<0.001),进一步两两比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。Child-Pugh A级组、B级组、C级组sSema4D含量分别为2.42(0.59~5.65)ng/mL、4.92(2.75~12.73)ng/mL、14.18(4.59~18.43)ng/mL,3组间比较差异有统计学意义(H=11.889,P=0.003),进一步两两比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。sSema4D水平与乙型肝炎肝硬化患者的ALT、HBV DNA定量的表达水平均呈明显正相关(r值分别为0.294、0.430,P值均<0.05)。结论Sema4D在乙型肝炎肝硬化患者T淋巴细胞膜上低表达,在血清中高表达。sSema4D可能通过影响乙型肝炎肝硬化患者的ALT、HBV DNA水平,参与疾病的发生发展。