Rho GTPase参与大鼠烧伤所致皮肤微静脉通透性增高

摘要

cqvip:目的观察烧伤早期烧伤部位皮肤微静脉通透性的改变及Rho信号转导通路和细胞外钙的作用。方法Sprague_Dawley雄性大鼠 ,体重170～200g,3～4月龄 ,用13.3 %氨基甲酸乙酯加0.5 %氯醛糖肌肉注射麻醉。随机分为对照组、烧伤组、烧伤+Y -27632(Rho激酶抑制剂)组、烧伤 +EDTA(钙螯合剂)组和EDTA组。动物腹部皮肤剪毛后 ,烧伤组用沸水(90～95℃)接触皮肤40～60s ,30min后分离烫伤部位皮肤取皮瓣 ,并立即放置在4℃生理盐水中。对照组和单纯EDTA组不做沸水处理 ,直接取皮瓣。参考YuanYuan等报道的用荧光比例技术测定血管通透性的方法。皮瓣置体视显微镜下 ,用显微外科技术小心分离口径60～95μm ,长1.0～1.2mm ,无分支皮肤微静脉 ,将其两端剪断 ,转移到含有37℃白蛋白生理盐溶液(APSS)的玻璃微管插管器的浴槽中 ,插管 ,灌流 ,用动态荧光测量技术测量血管通透性 ,通透性的大小以相关通透系数(apparentpermeabilitycoefficient,Pa ,单位10-6cm/s)表示。Pa值越大 ,通透性越高。烧伤 +Y -27632组、烧伤 +EDTA组和单纯EDTA组 ,于基础Pa值稳定后 ,换含Y -2763230μmol或EDTA1mmol的APSS孵育 ,观察60min ,再换不含Y -27632或EDTA的APSS ,继续观察30min。结果烧伤组血管通透性增加 ,Pa值为1.05±0.15 ,明显高于对照组0.32?