七叶树种胚细胞培养生产七叶皂苷类物质研究

摘要

目的:建立以七叶树种胚为外植体进行组织培养生产七叶皂苷的体系。方法:采用正交试验法探讨了超声波法提取七叶树种胚愈伤组织中七叶皂苷的最佳工艺;通过改变激素类型和浓度,筛选出适合七叶树种胚愈伤组织增殖的最佳培养基,并对愈伤组织细胞生长与次生代谢物积累的规律进行初步分析;利用水杨酸Fenton试剂法和邻苯三酚自氧化法对愈伤组织提取液的抗氧化性进行初步探索。结果:七叶树种胚愈伤组织中七叶皂苷的最佳提取工艺为:超声温度30℃,超声时间40 min,乙醇浓度60%,液料比70∶1。愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 8.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,在最佳增殖培养基上,愈伤组织的最佳继代和收获期均为25 d。对愈伤组织比生长速率与七叶皂苷比合成速率进行分析,发现七叶树种胚愈伤组织细胞生长与次生代谢产物的合成没有一定的规律性。愈伤组织提取液对超氧自由基和羟自由基都具有一定的清除作用。结论:该研究建立了七叶树种胚细胞培养生产七叶皂苷的体系。