基于ISSR的半夏离体培养材料遗传稳定性研究

摘要

目的：对连续继代的1～8代组培苗及移栽后1～3代半夏进行遗传稳定性分析，为半夏人工种子的研制提供参考依据。方法：以块茎作为外植体离体培养的连续1～8代组培苗、移栽后的1～3代半夏为材料，筛选引物、最佳退火温度以及DNA模板，建立ISSR-PCR反应体系，统计条带，计算多态率；并利用Ntsyspc 2.1对条带数据进行聚类分析。结果：筛选出18个条带清晰、完整的引物，共扩增出225个条带；其中1～4代组培苗及移栽后1～3代半夏均为单态带，多态位点百分率为0,5～8代组培苗共有32个多态条带，多态率2.78%～10.26%;UPGMA聚类结果表明1～4代组培苗基因型没有发生明显改变。结论：连续继代1～4代组培苗及移栽后1～3代半夏具有遗传稳定性，可作为优选材料用于半夏的人工繁殖；为半夏人工种子研制、良种繁育及大规模工厂化生产提供了分子理论依据。