烟草种子直接诱导愈伤组织的方法探究

摘要

以烟草种子为材料,探究从种子直接诱导出愈伤组织的方法。结果表明:烟草种子愈伤诱导受2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄氨基嘌呤(6-BA)不同激素配比影响,其中,在0.1~2.0 mg/L 2,4-D和6-BA的激素浓度范围内均能诱导出愈伤组织,但大小和质量各不相同。值得注意的是,种子在含1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA的培养基中培养,能较快诱导出愈伤组织,但愈伤组织块较为松散;而在含0.1 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA的培养基中培养,诱导出的愈伤组织较为紧密。进一步通过石蜡切片观察发现,在1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA培养条件下诱导出的愈伤组织细胞较大,但排列不规则,多为非胚性细胞;相反,在0.1 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA培养条件下诱导出的愈伤组织细胞虽然较小,但排列规则,多为胚性细胞。研究结果为从烟草种子诱导培养愈伤组织提供新的技术参考,也为烟草遗传转化研究提供便利。