Ephrin-B3在癫痫大鼠海马中的动态表达变化

摘要

目的 检测癫痫大鼠模型Ephrin-B3的动态表达,探讨其在颞叶癫痫中致痫作用.方法 SD雄性大鼠随机分成对照组和实验组,构建氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠模型,在癫痫持续状态(SE)诱导成功后7 d(急性期)、14 d(静止期)、60 d(慢性期)分别采用Real-time qPCR、Western blot及免疫组化方法检测大鼠海马齿状回Ephrin-B3 mRNA及蛋白的表达及分布.结果 在SE后的急性期和静止期,实验组大鼠均未见自发痫性发作;慢性期实验组大鼠有节律性点头、咀嚼、单侧或双侧前肢阵挛发作.荧光定量PCR结果显示:与对照组比较,急性期癫痫大鼠海马的Ephrin-B3 mRNA表达水平下降,静止期下降最为明显,慢性期有所回升,但仍低于对照组(P<0.001).Western blot检测Ephrin-B3蛋白的表达水平与mRNA表达趋势相一致:与对照组比较,致痫后7 d、14 d、60 d的Ephrin-B3蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P<0.001).免疫组化结果显示,Ephrin-B3蛋白主要分布于海马齿状回的颗粒细胞胞膜上,其光密度值与mRNA的变化趋势相一致(P<0.001).结论 Ephrin-B3在海马组织的动态变化可能与慢性自发痫性发作密切相关.