隔药灸对克罗恩病大鼠结肠CD206、AMPK和TSC2的调节作用研究

摘要

目的:观察隔药灸对克罗恩病(CD)大鼠结肠M2型巨噬细胞标志物CD206、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和结节硬化复合物(TSC)2蛋白表达的影响,探讨隔药灸治疗CD的作用机制.方法:将26只无特定病原体级雄性大鼠随机分为正常组、模型组和隔药灸组.采用5%(W/V)2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)与50%乙醇按2:1(体积比)混合后灌肠,制备CD模型.模型制备成功后,隔药灸组取气海及双侧天枢进行隔药灸.采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠结肠组织病理学变化;应用免疫组化技术检测结肠CD206蛋白表达;应用免疫印迹、免疫荧光和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测结肠AMPK、TSC2蛋白和mRNA表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜受损,上皮层缺失,黏膜下层增厚、血管增生,单核细胞和淋巴细胞大量浸润,出现深达肌层的裂隙状溃疡;隔药灸组大鼠肠道炎症减轻,肠上皮可见愈合性溃疡.与正常组比较,模型组大鼠结肠CD206蛋白、AMPK和TSC2蛋白及mRNA表达均降低(均P<0.01);与模型组比较,隔药灸组大鼠结肠CD206蛋白表达增高(P<0.01),AMPK、TSC2蛋白及mRNA表达均升高(均P<0.05).结论:隔药灸能减轻CD大鼠肠道炎症,提高结肠CD206蛋白表达,上调结肠AMPK、TSC2蛋白及mRNA表达.