小檗碱对佐剂诱导型类风湿性关节炎大鼠OPG-RANKL的作用研究

摘要

目的探究小檗碱对佐剂诱导型类风湿性关节炎大鼠OPG-RANKL的作用。方法SPF级别SD大鼠,25只,随机分为对照组、模型组、小檗碱20 mg/kg组(低剂量组)、小檗碱40 mg/kg组(中剂量组)和小檗碱60 mg/kg组(高剂量组),n=5。向大鼠的左后爪足垫注射100μL含有10 mg/mL结核分枝杆菌完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)建立佐剂诱导型类风湿性关节炎(AIA,adjuvant-induced arthritis)大鼠模型,灌胃给予不同剂量的小檗碱治疗,每天1次,连续28 d。采用排水法测定大鼠足肿胀,并进行关节炎评分;采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清中白介素(IL,Interleukin)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-α含量;采用苏木精-伊红染色观察踝关节病理变化;采用蛋白免疫印迹检测组织中p-IκBα、p-p65、RANKL、OPG表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠的足肿胀和关节炎评分均显著升高,血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量显著升高,踝关节出现大量的炎性细胞浸润、滑膜组织增生、关节狭窄和血管痉挛,模型组大鼠组织中p-IκBα、p-p65和RANKL的蛋白表达显著升高,OPG表达下降;与模型组比较,小檗碱治疗后,AIA大鼠的足肿胀和关节炎评分显著降低,血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量显著下降,病理变化明显缓解,并且组织中p-IκBα、p-p65和RANKL的蛋白表达显著降低,OPG表达升高,呈剂量依赖性。结论小檗碱对类风湿性关节炎具有潜在的治疗活性,并且与抑制OPG/RANKL/NF-κB信号有关。