miR-4753-3p靶向IGFBP2抑制胃癌细胞的增殖和侵袭

摘要

目的 探讨微小RNA (microRNA,miRNA,miR)-4753-3p对胃癌细胞株增殖、侵袭的影响及其调控机制.方法 采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)分析胃癌细胞株(HS-746T、SGC7901、BGC823、MGC803)和正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)中miR-4753-3p的表达.选择miR-4753-3p表达最低的胃癌细胞株,采用脂质体转染技术分别转染miR-NC(对照组)和miR-4753-3p mimics(试验组).分别采用CCK-8法和Transwell侵袭试验检测miR-4753-3p对胃癌细胞株增殖、侵袭的影响.生物信息学预测miR-4753-3p可能的靶基因,采用双荧光素酶报告基因试验、qRT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)验证miR-4753-3p的靶基因.结果 正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞株(HS-746T、SGC7901、BGC823、MGC803)中miR-4753-3p的表达分别为(1.00±0.03)、(0.56±0.03)、(0.77±0.05)、(0.31±0.03)和(0.65±0.04).与GES-1细胞相比,miR-4753-3p在胃癌细胞株中呈低表达(均P＜0.01),miR-4753-3p表达最低的胃癌细胞株是BGC823细胞(P＜0.01).与对照组相比,过表达miR-4753-3p后BGC823细胞的增殖能力显著降低(P＜0.05),其侵袭能力显著降低(P＜0.01).生物信息学显示胰岛素样生长因子结合蛋白2 (IGFBP2)可能是miR-4753-3p的靶基因.双荧光素酶报告基因结果显示miR-4753-3p可与IGFBP2信使RNA (mRNA)3'UTR互补结合(P＜0.01).与对照组比较,高表达miR-4753-3p后BGC823细胞中IGFBP2基因表达明显下降(P＜0.01).结论 miR-4753-3p在胃癌细胞株中低表达,miR-4753-3p可能靶向负调控IGFBP2表达降低胃癌BGC823细胞增殖和侵袭能力.