AGEs对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中β-catenin、ALP的影响及PTH的干预作用

摘要

目的:初步探讨在培养的骨髓间充质干细胞(BMSCs)层面，晚期糖基化终末产物(AGEs)对BMSCs成骨分化中β-catenin、碱性磷酸酶(ALP)的影响，以及甲状旁腺激素(PTH)的干预及其机制。方法:取第三代BMSCs，检测AGEs对其增殖的影响。将BMSCs分为对照组、AGEs组、Wnt3a组、AGEs+Wnt3a组；对照组、AGEs组、AGEs+晚期糖基化终末产物受体(RAGE)抗体组；对照组、AGEs组、AGEs+PTH组；对照组、PTH组、PTH+Dickkopf相关蛋白1(DKK1)组，应用Western-blot法检测β-catenin、ALP蛋白的表达。结果:BMSCs的增殖可以被AGEs抑制。0.2 g/L AGEs干预BMSCs 7 d，AGEs抑制β-catenin、ALP蛋白表达有统计学差异；给予Wnt通路促进剂Wnt3a后，AGEs作用被抑制，β-catenin、ALP蛋白表达较AGEs组增加；加入10 mg/L RAGE中和抗体共培养，与AGEs组相比，β-catenin、ALP蛋白表达增高。加入PTH后可以逆转AGEs的负性成骨作用，β-catenin、ALP蛋白表达增高；加入Wnt通路阻滞剂DKK1共培养，β-catenin、ALP蛋白表达较PTH组增加。结论:AGEs-RAGE通过Wnt/β-catenin信号通路抑制大鼠BMSCs ALP蛋白表达；PTH逆转AGEs对β-catenin、ALP的负性作用。