人凝血因子Ⅷ澄清过滤后层析上样对层析效率的影响

摘要

目的 分析在人凝血因子Ⅷ(human coagulation factor Ⅷ,FⅧ)层析纯化上样前增加澄清过滤对FⅧ层析效果的影响.方法 采用直接上样和澄清过滤后上样两种方式,对各10批次FⅧ进行层析纯化,比较层析参数(流速、柱压、上样量)、洗脱液效价、洗脱液体积、洗脱液比活、成品量及成品质量,指标(效价、水分、可见异物、磷酸三丁酯残留量、聚山梨酯80残余量).结果 经澄清过滤后上样,洗脱液效价高于直接上样且差异有统计学意义(t=28.56,P=0.000),层析参数(流速、柱压、上样量)、洗脱液体积、洗脱液比活差异均无统计学意义,成品产量高于直接上样且差异有统计学意义(t=23.14,P=0.000).使用澄清过滤后,成品质量指标效价(t=0.95,P=0.183)和水分(t=1.12,P=0.145)差异均无统计学意义,可见异物、磷酸三丁酯残留量、聚山梨酯80残留量均符合质量标准.结论 在FⅧ层析生产过程中,增加澄清过滤能提高层析收率和成品收率,且对产品质量无影响.