17β-雌二醇对人晶状体上皮细胞的保护作用与细胞焦亡的相关性研究

摘要

目的:探索17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对人晶状体上皮细胞的保护作用与细胞焦亡的相关性及其机制.方法:体外培养人晶状体上皮细胞,设立空白对照组、H2O2处理组(含100μmol/L H2O2培养基培养12h)、雌二醇组(分别于含1×10-3、1×10-2、1×10-1μmol/L雌二醇培养基中培养24h后,再加入含100μmol/L H2O2的培养基处理12h).扫描电子显微镜观察细胞超微结构;免疫荧光染色法检测Gasdermin D(GSDMD)分布及荧光强度;CCK-8法检测细胞活力;TUNEL法检测细胞焦亡;免疫印迹实验(Westen-blot)检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白水解酶-1(Caspase-1)、GSDMD、NOD样受体蛋白(NLRP3)表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素-1β(IL-1β)表达.结果:与空白对照组相比,H2O2处理组的细胞活力下降,细胞焦亡率升高,Caspase-1、GSDMD、NLRP3蛋白的表达上调,IL-1β分泌增多.而与H2O2处理组相比较,雌二醇组细胞焦亡率下降,Caspase-1、GSDMD、NLRP3蛋白的表达下调,IL-1β分泌量减少,并随雌激素浓度的递增,而呈递减趋势.结论:17β-雌二醇对人晶状体上皮细胞的保护作用具有浓度依赖性,其保护机制与抑制人晶状体上皮细胞焦亡过程相关,并有经典焦亡途径参与.