水稻核糖体蛋白基因OsRPL2的克隆、序列分析及表达载体构建

摘要

依据鉴定得到的水稻(Oryza sativa L.)核糖体蛋白质OsRPL2的序列设计了引物,从水稻叶片的cDNA中扩增得到目的片段.并对目的基因序列进行了测序鉴定和序列分析,同时在大肠杆菌中构建水稻核糖体蛋白质基因OsRPL2的原核表达载体pGEX-4T1-RPL2,转化入BL21 (DE3)后利用IPTG诱导外源蛋白质表达并检测.结果表明,成功扩增出了水稻核糖体蛋白质基因OsRPL2的cDNA序列,大小为1 570 bp,其编码的蛋白质含有502个氨基酸.根据序列分析的结果,水稻OsRPL2基因与多个植物核糖体蛋白质L2基因具有较高的相似性,并且其编码的OsRPL2蛋白质具有2个与核糖体蛋白质功能相关的功能域.在此基础上,构建了具有pGEX-4T1-RPL2重组子,诱导表达后,纯化得到了带有GST标签的可溶性OsRPL2蛋白质.