溶血和脂血标本中乙肝病毒DNA提取方法的选择与评价

摘要

目的　选择合适的方法提取溶血、脂血等异常标本中乙肝病毒DNA(HBV DNA) ,评价其去除扩增效率影响因素的能力。方法　分别采用 15 %聚乙二醇 (PEG)沉淀煮沸法 ,Chelex10 0树脂吸附法以及直接加热煮沸法提取HBV DNA ,用Taqman技术对HBV DNA进行实时定量检测用于评价其去除扩增效率影响因素的能力。 结果　当胆固醇≤ 12mmol/L ,三种提取方法的HBV DNA水平与胆固醇的浓度无相关关系 ;直接加热煮沸法的HBV DNA水平与甘油三酯和血红蛋白的浓度呈负相关 ,相关系数分别为 - 0 .97和 - 0 .93,当血红蛋白浓度从 10 g/L升高到 2 0g/L时 ,HBV DNA水平下降2 9.5倍 ,甘油三酯浓度从 15mmol/L升高到 35mmol/L时 ,HBV DNA水平下降 2 .88倍。结论　直接加热煮沸法去除血红蛋白与甘油三酯的能力最差 ;而高胆固醇标本可选用上述三种方法提取HBV