miR-29a抑制类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞炎性反应的作用

摘要

目的 探究miR-29a在类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞的炎性反应中的作用及作用机制.方法 将NC和miR-29a mimic质粒转染滑膜细胞,设为NC组和miR-29a mimic组,以未转染的细胞为空白组(Control),转染48 h后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-29a表达,MTT实验、流式细胞术检测细胞增殖、凋亡情况;酶联免疫吸附法(Elisa)检测细胞中白介素-lβ(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平;免疫印迹法检测细胞中骨髓细胞白血病蛋白1(Mcl-1)表达,荧光素酶活性实验测定miR-29a对骨髓细胞白血病蛋白1(Mcl-1)的调控作用.结果 与Control组、NC组比较,miR-29amimic组滑膜细胞miR-29a表达升高,增殖抑制率、凋亡率升高,IL-1β、TNF-α、IL-6水平降低,Mcl-1、Bcl-2蛋白表达降低,Caspase-3、Bax表达升高(P＜0.05);与miR-29a-NC+ Mcl-1 3'UTR-Wt组比较,miR-29a-mimic +Mcl-1 3'-UTR-Wt组荧光素酶活性明显降低(P＜0.05).结论 miR-29a过表达可抑制滑膜细胞增殖,促进其凋亡,降低炎性因子水平,推测这一作用是miR-29a靶向Mcl-1实现的.