鼓槌石斛未成熟种子无菌萌发与小苗组培快繁的研究

摘要

本文报道鼓槌石斛未成熟种子在离体培养下发育成苗及离体快繁的研究结果.在附加1.0mg/L BA和0.5 mg/L NAA的MS培养基上,鼓槌石斛未成熟种子接种后最初一个星期内,发育较慢,以后明显较快,至接种后2w时,种胚的长度或直径增加到接种前的1.5倍～2.0倍;至接种后3w时也有10%～15%的种胚突破种皮,形成裸露的种胚(原球茎体);至接种后第4w时,可以观察到裸露的种胚开始萌芽,首先出现盾片子叶,以后第1,第2和第3片幼叶逐渐依次形成.从接种到第1片幼叶(真叶)形成时,约需80d.在初代培养基上未观察到根的形成,这可能与初代培养基中追加有1.0 mg/L BA有关.由于同一蒴果中的种子是发育不同步的,故种胚、原球茎体以及幼苗的发育也是不同步的.培养物(无根幼苗及原球茎体)转接到成分与初代培养基完全相同的新鲜培养基上进行继代培养时,原球茎体及无根幼苗的基部会增殖形成新生的原球茎体,继而发育成幼苗;少部分原球茎体在发育成苗之前脱分化形成颗粒状愈伤组织.这种愈伤组织可以增殖形成新的愈伤组织;或分化出芽点,继而发育成幼苗;或分化出原球茎体,继而再发育成幼苗.生根壮苗培养过程中试验了5种基本培养基,其适应性按顺序依次为H＞1/3 MS＞1/2 MS＞SJ-1＞MS.