微小RNA-34a对A549细胞增殖的影响及其可能机制

摘要

目的 探讨微小RNA(miRNA)-34a对肺癌细胞增殖的影响及其可能机制.方法 采用定量PCR法分别检测人肺癌细胞系A549、H1299、PC9及人正常肺上皮细胞系BEAS-2B中miRNA-34a的表达情况.将A549细胞分为miRNA-34a模拟物组、阴性对照组和空白对照组,miRNA-34a模拟物组、阴性对照组分别转染miRNA-34a模拟物和miRNA-34a模拟物随机系列,空白对照组不做处理,比较各组细胞的增殖抑制率.采用TargetScan生物信息学预测软件对miRNA-34a的作用靶点进行预测,采用双荧光素酶报告基因系统验证miRNA-34a的作用靶点,运用蛋白免疫印迹法检测A549细胞中miRNA-34a作用靶点蛋白的表达水平.结果 相比于正常肺上皮细胞,肺癌细胞系A549、H1299、PC9中miRNA-34a的表达水平降低(均P<0.05);200 nmol/L、100 nmol/L的miRNA-34a模拟物转染组,细胞增殖抑制率均高于空白对照组和相同剂量的阴性对照组(均P<0.05);双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,信号传导与转录激活因子3(STAT3)是miRNA-34a的作用靶点,miRNA-34a模拟物转染A549细胞24 h后,miRNA-34a模拟物转染组STAT3蛋白表达水平低于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05).结论 miRNA-34a可抑制肺癌细胞增殖,机制可能与其抑制STAT3下游信号通路的激活有关.