白扁豆总皂苷降糖活性组分筛选及其功能评价

摘要

目的 基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术筛选白扁豆总皂苷中α-葡萄糖苷酶抑制剂活性成分及分子对接研究,评价其体内降糖活性.方法 以阿卡波糖为阳性对照,半数抑制浓度(IC50)为α-葡萄糖苷酶抑制活性评价指标,建立体外α-葡萄糖苷酶抑制模型.运用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术筛选并鉴定白扁豆总皂苷中的α-葡萄糖苷酶抑制剂活性成分,进一步对其中主要活性单体进行活性验证和酵母源α-葡萄糖苷酶和人源性α-葡萄糖苷酶的同源建模及分子对接,采用糖尿病小鼠模型评价其降糖活性.结果 从白扁豆总皂苷中筛选并鉴定出了竹节参皂苷IVa等15个具有潜在α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物,同时对其中主要活性单体竹节参皂苷IVa进行活性验证,发现其有较强α-葡萄糖苷酶抑制活性,α-葡萄糖苷酶的IC50为(565.2±1.026)μg/mL低于阳性对照的阿卡波糖的IC50为(706.6±1.058)μg/mL,竹节参皂苷IVa与酵母源α-葡萄糖苷酶和人源性α-葡萄糖苷酶分子对接结合能分别为–6.1和–7.7 kcal/mol,与两者都具有较强的结合活性,竹节参皂苷IVa显著降低丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)、尿素(UREA)、肌肝(CREA)和胆固醇(CHO)水平(P<0.05).此外,对糖尿病小鼠损伤的肝脏和胰腺细胞有一定的修复作用.结论 研究将为从白扁豆总皂苷中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂及结构改造提供依据.