升降散调控TLR-4/NF-κB信号通路对脂多糖诱导脓毒症大鼠心肌损伤的影响

摘要

目的研究升降散调控TLR-4/NF-κB信号通路对LPS诱导脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法采用腹腔注射LPS法构建急性脓毒血症大鼠模型,大鼠随机分为正常组(n=6),脓毒症模型组(n=6),中药组(n=6),抑制剂组(n=6),除正常组外,各组均腹腔注射注射脂多糖,miR-146a抑制剂组心肌内注射miR-146a抑制剂(0.2μl/g),中药组升降散灌胃。48 h后采集大鼠心肌组织,观察心肌组织切片病理改变,测定白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等因子的水平,及miRNA-146a、NF-κB mRNA、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、IL-1βmRNA活性水平。结果与正常组相比,各组IL-1、IL-6、TLR4及NF-κB蛋白水平升高(P<0.05),模型组及抑制组TNF-α高于对照组(P<0.05);模型组miR-146a、NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1基因表达增高(P<0.01),中药组miR-146a及NF-κB表达增高(P<0.05);抑制剂组NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1表达增高(P<0.01)。与模型组相比,中药组、TNF-α、TLR4及NF-κB蛋白水平降低(P<0.05),中药组miR-146a表达增高,而NF-κB、TNF-α、IL-1及IL-6基因表达降低(P<0.05);抑制剂组IL-6、TNF-α、TLR4及NF-κB活性升高(P<0.01),抑制剂组miR-146a表达降低(P<0.01),NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1表达增高。与抑制剂组相比,中药组IL-1、IL-6、TNF-α、TLR4及NF-κB蛋白水平降低(P<0.01),miR-146a基因表达增高,而NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1表达降低(P<0.01)。结论升降散能减轻脓毒症大鼠心肌损害,其机制可能与其促进miRNA-146a表达,负反馈调节TLR-4/NF-κB信号通路,减轻抑制炎症反应有关。